Лиофилизација, позната и као сушење смрзавањем, је процес који се користи за очување биолошког материјала уклањањем вода из узорка, која подразумева прво замрзавање узорка, а затим сушењем под вакуумом, на врло мало температуре. Лиофилизовани узорци се могу чувати много дуже од необрађених узорака.
Зашто се користи лиофилизација?
Лиофилизација, или лиофилизацијом сушења бактеријских култура, стабилизира културе за дуготрајно складиштење уз минимализирање штете која може настати строгим сушењем узорка. Многи микроорганизми преживе добро када се лиофилизирају и могу се лако рехидратирати и узгајати у културама, након дужег времена складиштења.
Лиофилизација се такође користи у биотехнологија и биомедицинске индустрије за очување вакцина, узорака крви, пречишћени протеинии други биолошки материјал.
Овај кратки лабораторијски поступак може се користити са било којим комерцијално доступним сушилицом за замрзавање како бисте сачували колекцију своје културе.
Процес
Процес лиофилизације је заправо примена физичког феномена који се назива сублимација: прелазак неке супстанце из чврстог у гасовито стање, без претходног проласка кроз течност фаза. Током лиофилизације, вода из смрзнутог узорка се уклања у облику водене паре, а да се узорак претходно не одмрзава.
Заједничке грешке
Једна од најчешћих грешака када је у питању лиофилизација је непознавање талишта вашег узорка, што отежава одабир исправног лиофилизатора. Узорци се могу растопити током процеса. Још једна честа грешка је мишљење да је хладније хладније када се сушење замрзава на хладњаку. Током примарног сушења требали бисте подесити температуру на полици мало испод еутектичке температуре узорка. Требало би да постоји довољно топлоте да се молекули узорка подстакну да се крећу - али спречавају топљење.
Трећа грешка је погрешна опрема за ваше узорке. Будући да се сушилице за замрзавање користе у групним поставкама, пре куповине требало би да знате следеће:
- Колика ће влага бити лиофилизована
- Који је узорак (и еутектичка температура)
- Како правилно користити сушилицу за замрзавање
Ако се јединица не користи правилно, може покварити све узорке. Што нас доводи до још једне уобичајене грешке: Не одржавање вакум пумпе. Да би лиофилизација радила, пумпа мора бити у одличном радном стању. Ако пумпа буде отворена 30 минута пре и после процеса сушења смрзавањем, пумпа ће повећати животни век пумпе. Отварањем баластног гаса гаси се нечистоће из пумпе да се спрече оштећења на унутрашњим компонентама. Требало би често проверавати уље пумпе на промену боје и честица и мењати уље по потреби. Редовне промене уља држе пумпу у оптималном вакууму током процеса сушења смрзавањем.
И на крају, погрешна опрема за сушење замрзавањем за ваш поступак лиофилизације такође може бити велика грешка. Треба ли вам узорак чепа под вакумом? Тада је потребна зауставна комора. Да ли сушите у тиквицама? Тада обавезно имате комору за сушење са отворима.
Избегавањем горњих грешака, можете обезбедити бољу негу сушилице за замрзавање и пумпе и имати боље узорке када се врши сушење замрзавањем.
Референце
Лабцонцо Невс. "Топ 5 грешака у процесу лиофилизације."