Да би се различите врсте одвојиле од уобичајених предака и покренуле се еволуција, мора доћи до репродуктивне изолације. Постоји неколико врста репродуктивне изолације која води специјализацији. Једна од најчешћих метода је презиготска изолација која се дешава пре оплодње између гаметес и спречава различите врсте сексуално се репродуцирају. У основи, ако се појединци не могу репродуцирати, сматра се да су различити врста и разилазе се на дрвету живота.
Постоји неколико врста презиготске изолације у распону од некомпатибилности гамета до понашања што резултира некомпатибилношћу, па чак и врстом изолације која физички инхибира појединце узгој.
Механичка изолација - некомпатибилност сексуалних органа - вероватно је најједноставнији начин да се спречи репродукција појединаца једни са другима. Било да се ради о облику репродуктивних органа, локацији или разликама у величини забранити појединцима да се спајају, када се сексуални органи не уклапају, парење није вероватно да се догоди.
У биљкама механичка изолација делује мало другачије. Будући да величина и облик нису битни за репродукцију биљака, механичка изолација обично је резултат употребе различитог опрашивача за биљке. На пример, постројење за које је структурирано
опрашивање пчела неће бити компатибилни са цвећем на које се ослањају хуммингбирдс да шире свој полен. Иако је то још увек последица различитих облика, није битан облик стварних гамета, већ неусклађеност облика цвећа и опрашивача.Различите врсте имају тенденцију да имају различите сезоне узгоја. Време циклуса плодности код жена може резултирати временском изолацијом. Сличне врсте могу бити физички компатибилне, али се ипак не могу размножавати због сезона парења које се дешавају у различито доба године. Ако су женке једне врсте плодне током одређеног месеца, али мужјаци се не могу размножавати у то доба године, то може довести до репродуктивне изолације између две врсте.
Понекад се сезоне парења врло сличних врста донекле преклапају. Ово је посебно тачно ако врсте живе у различитим областима, не остављајући никакве шансе за хибридизацију. Међутим, показало се да сличне врсте које живе у истом подручју углавном немају фазе преклапања парења, чак и ако се налазе у различитим срединама. Највероватније, ово је природа прилагођавања која је осмишљена да смањи конкуренцију за ресурсе и другове.
Друга врста презиготске изолације између врста има везе са понашањем појединаца, а нарочито са понашањем у току парења. Чак и ако су две популације различитих врста механички и временски компатибилне, то је њихова стварно ритуално понашање парења могло би бити довољно да врсте остане у репродуктивној изолацији од једне други.
Ритуали парења, заједно са другим потребним понашањима парења - попут парења парења и плесова - веома су потребни за мужјаке и жене исте врсте како би указали да је време за репродукцију. Ако се ритуал парења одбаци или не препозна, тада се неће догодити парење и врсте ће се репродуктивно изолирати једна од друге.
На пример, тхе плавоноги плијен птица има врло сложен плес парења који мужјаци морају да изводе како би пробудили женку. Женка ће или прихватити или одбити напредовање мужјака, међутим, друге врсте птица које немају исту женски плес у потпуности ће занемарити плес, што значи да немају шансе да се размножавају са женком плавог стопала бооби.
Чак и веома сродне врсте имају склоности према томе где живе и где се размножавају. Понекад су ове пожељне локације за репродуктивне догађаје неспојиве између врста, што доводи до изолације станишта. Очигледно је да ако јединке две различите врсте не живе нигде близу, неће бити могућности за размножавање. Ова врста репродуктивне изолације доводи до још додатних спецификација.
Међутим, чак и различите врсте које живе на истом локалитету можда нису компатибилне због свог преферираног места репродукције. Постоје неке птице које више воле да одређена врста стабла, или чак различити делови истог дрвета, полажу јаја и праве гнезда. Ако се сличне врсте птица налазе на том подручју, они ће одабрати различите локације и неће се крижати. Ово задржава врсте одвојене и неспособне да се размножавају једна са другом.
Гаметска изолација осигурава да само сперма исте врсте може продријети у јаје те врсте, а не и друге. Током сексуалне репродукције женско јаје се стапа са мушком спермом и заједно стварају зиготу. Ако сперма и јаје нису компатибилни, оплодња не може доћи. Због неких хемијских сигнала које јаје ослобађа, сперматозоиди га можда чак и не привлаче. Други фактор који спречава фузију је сперма која не може да продре у јаје због сопственог хемијског састава. Било који од ових разлога је довољан да заустави фузију и спречи стварање зиготе.
Ова врста репродуктивне изолације је посебно важна за врсте које се споља размножавају у води. На пример, женке већине врста риба једноставно испуштају своја јаја у воду свог омиљеног места узгоја. Мушке рибе те врсте тада долазе и пуштају сперму преко јајашца да их оплоде. Међутим, с обзиром да се то одвија у течном окружењу, неки спермији се одвајају од молекула воде и распршују се. Да не постоје механизми за гетску изолацију, било која сперма се може стопити са било којим јајашцем, што би резултирало да се хибриди било које врсте тада паре у води тамо.